Процедура визначення груп крові за системою АВОполягає у виявленні антигенів А і В в еритроцитах за допомогою стандартних антитіл і використанням агглютінінов в плазмі або сироватці аналізованої крові стандартними еритроцитами. Методика розроблена на початку XX століття і до сих пір активно застосовується в медицині. Визначення антигенів А і В здійснюється завдяки Цоліклони анти-А і анти-В.
У донорів завжди визначаються не тільки антигенив еритроцитах, але і аглютиніни в сироватці (плазмі) із застосуванням стандартних еритроцитів. Як біоматеріалу використовується венозна кров. Перед дослідженням необхідно відмовитися від жирної їжі за добу до аналізу і не курити за півгодини до здачі тесту. Групи крові визначають двічі: спочатку в лікувальному відділенні, де заготовлюється матеріал, а потім підтверджують дослідженням в лабораторії.
Визначення груп крові за системою АВО єосновним тестом, який використовується в трансфузіології. Також подібна система груп крові є у деяких тварин, наприклад у шимпанзе, горил і бонобо.
У науці існує загальноприйнята думка про те, щометодика визначення груп крові за системою АВО була виявлена вперше Карлом Ландштейнером, австрійським вченим, в 1900 році. Тоді він описав у своїй праці три типи антигенів. За це через тридцять років йому було присуджено Нобелівську премію з медицини і фізіології. Через те, що між вченими раніше не було тісних зв'язків, пізніше встановили, що чеський лікар-серолог Ян Янський незалежно від пошуків К. Ландштейнера вперше описав чотири групи крові людини, але його дослідження були не відомі широкій аудиторії. В даний час саме класифікація, розроблена Я. Янським, застосовується в Росії і республіках колишнього СРСР. У США У. Л. Мосс створив свою схожу роботу в 1910 р
Група крові повинна визначатися в приміщенні зхорошим освітленням з дотриманням температурного діапазону від 15 до 25 градусів Цельсія, так як відхилення від цієї норми можуть вплинути на результати дослідження. На платівці або тарілці пишуться ініціали та прізвище пацієнта. Зліва направо або по колу наносять стандартні позначення груп (О (I), A (II), В (III)). Під ними розміщують по краплині відповідні сироватки окремими піпетками для кожного виду. Потім до них додається кров пацієнта. Матеріал для дослідження береться з мочки вуха або пальця. Цього вимагає техніка визначення групи крові за системою АВО.
Чи правомірно також використання еритроцитів,знаходяться в пробірці після того, як утворився згусток. Потрібно, щоб кількість сироватки було більше кількості доданої крові в десять разів. Після цього краплі перемішуються скляними паличками (окремо для кожної). Протягом п'яти хвилин, акуратно похитуючи пластинку, дивляться за появою реакції гемаглютинації. Вона виявляється в тому, що з'являються маленькі червоні грудочки, які зливаються потім в більш великі. Сироватка в цей час практично повністю втрачає колір.
Для того щоб усунути неправдиву гемаглютинаціюпростого склеювання еритроцитів, потрібно через три хвилини додати одну краплю фізіологічного розчину і перевірити, чи зберігається аглютинація. Якщо так, то вона є істинною. Все, визначення груп крові за системою АВО на цьому завершено.
В результаті можуть спостерігатися чотири реакції:
Методика визначення груп крові за системою АВО передбачає одночасне виявлення резус-фактора (Rh).
Поверхня пластинки попередньо змочують іпишуть на ній «контрольна сироватка» і «сироватка антирезус». Потім під написами розташовують одну-дві краплі потрібних реактивів і додають до них аналізований матеріал. Для цього також можна використовувати кров з пальця (в такій же кількості, як і обсяг сироватки) або еритроцити, що залишилися на дні пробірки після появи згустку (половина обсягу сироватки). Вибір матеріалу на кінцевий результат не впливає. Потім кров і сироватка перемішуються сухий скляній паличкою, після чого протягом п'яти хвилин очікують настання реакції. Для того щоб усунути неправдиві свідчення, через три-чотири хвилини додають ізотонічний розчин натрію хлориду (всього кілька крапель). Визначення групи крові за системою АВО і Rh проводиться дуже часто.
Якщо аглютинація еритроцитів у краплі зсироваткою відбувається, це вказує на позитивний резус крові. За статистикою Rh + зустрічається у 85% населення планети. Відсутність її дозволяє говорити про резус-негативної приналежності. Якщо аглютинація з'явилася в контрольній сироватці, значить вона прийшла в непридатність. На жаль, алгоритм визначення групи крові за системою АВО не завжди спрацьовує ідеально.
Неточності при визначенні приналежності крові тієї чи іншої групи залежать від наступних причин:
Можливі похибки при визначенні групи крові системи АВО перехресним способом:
Похибки, пов'язані з біологічною специфікою аналізованої крові, діляться на два типи.
Розглянемо кожен вид більш докладно.
Слабкі сироватки з минулим терміном придатності або мають титр менше 1:32 здатні зароджувати слабку і пізню аглютинацію. Застосування таких реактивів неприпустимо.
Використання негідних стандартних еритроцитівабо сироваток, приготованих в нестерильних умовах і законсервованих в недостатній мірі, призводить до появи «бактеріальної» аглютинації, що має неспецифічну природу.
Існує безліч популярних припущень прогрупах крові системи АВО, що з'явилися безпосередньо після її виявлення в різних світових культурах. Так, наприклад, в 30-ті роки минулого століття в Японії і деяких інших країнах отримала популярність теорія, що зв'язує групу крові з тим або іншим типом особистості. Подібні теорії популярні і на сьогоднішній день.
Є також думка, що людина, яка має групу А, схильний до важкого похмілля, Про пов'язана з хорошими зубами, а група А2 - з найвищим рівнем IQ. Але науково такі твердження не доведені.
Ми розглянули визначення груп крові за системою АВО за допомогою стандартних сироваток.
