Дослідження бактерій вимагають скрупульозної роботиз численним обладнанням та інструментарієм. Щоб мікроорганізми в лабораторних умовах максимально швидко розмножувалися і могли підтримувати нормальну життєдіяльність, використовуються спеціальні середовища живильні. Їх склад і біофізичні умови підходять для активного зростання бактеріальної культури.
Колонії бактерій в лабораторних умовахвирощуються на чашках Петрі, які заповнені желеподібним або напіврідким вмістом. Це і є середовища живильні, склад і властивості яких максимально наближені до природних для якісного зростання культури.
Застосовуються такі середовища в мікробіологічнихдослідженнях і в медичних діагностичних лабораторіях. Останні ведуть роботу найчастіше з мазками патогенних або умовно-патогенних бактерій, систематичні положення яких визначаються безпосередньо в установі.
Основне правило роботи з бактеріями - цеправильний підбір живильного середовища. Вона повинна підходити по численним критеріям, серед яких вміст мікро- та макроелементів, ферментів, постійне значення кислотності, осмотичного тиску і навіть відсоток кисню в повітрі.
Середовища живильні класифікуються на дві великі групи:
У роботі з бактеріями можуть використовуватися нетільки звичайні поживні середовища. Мікробіологія - велика наука, і тому при проведенні дослідження іноді потрібно зробити відбір мікроорганізмів по будь-якою ознакою. Використання диференційно-діагностичних середовищ в лабораторії дає можливість відібрати потрібні колонії бактерій на чашці Петрі за біохімічним ознакою їх життєдіяльності.
До складу таких середовищ завжди входять наступні компоненти:
1. Поживні елементи для росту клітин.
2. Аналізований субстрат (речовина).
3. Індикатор, який буде давати характерну забарвлення при протіканні певної реакції.
Прикладом може служитидиференційно-діагностичне середовище живильна «Ендо». Вона використовується для відбору колоній бактерій, які можуть розщеплювати лактозу. Спочатку таке середовище має рожево забарвлення. Якщо колонія мікроорганізмів не здатна розщеплювати лактозу, вона приймає звичайний білий колір. Якщо ж бактерії можуть розщеплювати цей субстрат, вони фарбуються в характерний яскраво-червоний колір.
У діагностичних лабораторіях часто ведетьсяробота з мазками, в яких міститься багато різних видів бактерій. Очевидно, що для якісної роботи необхідно якимось чином відібрати потрібні нам колонії з десятків сторонніх. Тут може допомогти живильне середовище для бактерій, склад якої ідеально підібраний для життєдіяльності тільки одного виду мікроорганізмів.
Наприклад, така елективна середовище придатної тількидля розмноження кишкової палички. Тоді з посіву безлічі бактерій на чашці Петрі ми побачимо тільки колонії тієї самої кишкової палички і ніякі більше. Перш ніж приступати до роботи, необхідно добре знати метаболізм досліджуваної бактерії, щоб вдало її відібрати з суміші інших видів.
Бактерії можуть вирощуватися не тільки на твердихсубстратах. Середовища живильні відрізняються між собою по агрегатному стані, що залежить від складу при виготовленні. Спочатку всі вони мають рідку консистенцію, а при додаванні желатину або агар в певному процентному співвідношенні суміш застигає.
Рідкі поживні середовища зазвичай знаходяться впробірках. Якщо з'являється необхідність вирощувати бактерії в таких умовах, додають розчин з пробою культури і чекають 2-3 діб. Результат може бути різним: випадає осад, утворюється плівка, плавають дрібні пластівці або утворюється каламутний розчин.
Щільна живильне середовище часто використовується вмікробіологічному дослідженні для вивчення властивостей колоній бактерій. Такі середовища завжди прозорі або напівпрозорі, щоб була можливість правильно визначити колір і форму культури мікроорганізмів.
Дуже просто готуються такі субстрати, якмясопептонний суміші на основі бульйону, желатину або агар. Якщо потрібно зробити твердий або напіврідкий субстрат, в рідину додають відповідно 2-3% або 0,2-0,3% желатину або агар. Вони грають головну роль в затвердінні суміші, але ніяк не є джерелом поживних речовин. Таким чином, і отримують середовища живильні, які придатні для росту бактеріальної культури.
