Regler for å bestemme blodgruppen i henhold til ABO-systemet

Fremgangsmåten for å bestemme blodgrupper i henhold til ABO-systemetbestår i å påvise antigener A og B i erytrocytter ved bruk av standard antistoffer og å bruke agglutininer i plasma eller serum i det analyserte blodet med standard erytrocytter. Teknikken ble utviklet på begynnelsen av 1900-tallet og brukes fortsatt aktivt i medisin. Bestemmelse av antigener A og B utføres takket være anti-A og anti-B-tsoliconer.

Grunnleggende begreper

Ikke bare antigener bestemmes alltid fra giverei erytrocytter, men også agglutininer i serum (plasma) ved bruk av standard erytrocytter. Venøst ​​blod brukes som et biomateriale. Før studien er det nødvendig å gi opp fet mat en dag før analysen og ikke røyke en halv time før du tar testen. Blodgrupper bestemmes to ganger: først i medisinsk avdeling, hvor materialet samles, og deretter bekreftet av forskning i laboratoriet.

Bestemmelse av blodgrupper i henhold til ABO-systemet erhovedtesten brukt i transfusiologi. Noen dyr har også et lignende blodgruppesystem, som sjimpanser, gorillaer og bonoboer.

Oppdagelseshistorie

Det er en allment akseptert mening i vitenskapen atmetoden for å bestemme blodgrupper i henhold til ABO-systemet ble først oppdaget av Karl Landsteiner, en østerriksk forsker, i 1900. Så beskrev han i sitt arbeid tre typer antigener. For dette ble han tildelt Nobelprisen i medisin og fysiologi, tretti år senere. På grunn av det faktum at det ikke var noen tette bånd mellom forskere før, ble det senere slått fast at den tsjekkiske serologen Jan Jansky, uavhengig av K. Landsteiners forskning, først beskrev fire menneskelige blodgrupper, men hans forskning var ikke kjent for et bredt publikum. For tiden er det klassifiseringen utviklet av Y. Yansky som brukes i Russland og republikkene i det tidligere Sovjetunionen. I USA skrev W.L. Moss et lignende verk i 1910.

Metode for å bestemme blodgrupper i henhold til ABO-systemet ved bruk av tsoliclones

Blodgruppen bør bestemmes i et rom medgod belysning mens temperaturområdet 15 til 25 grader Celsius opprettholdes, da avvik fra denne normen kan påvirke testresultatene. Pasientens initialer og etternavn er skrevet på plate eller plate. Fra venstre til høyre eller i en sirkel brukes standardbetegnelsene for grupper (O (I), A (II), B (III)). Under dem er det plassert dråpe for dråpe det tilsvarende serumet med separate pipetter for hver type. Deretter tilsettes pasientens blod til dem. Materialet for forskning er hentet fra øreflippen eller fingeren. Dette kreves av teknikken for å bestemme blodgruppen i henhold til ABO-systemet.

Det er også lovlig å bruke røde blodlegemer,i reagensrøret etter at blodproppen har dannet seg. Det er nødvendig at mengden serum er ti ganger mengden tilsatt blod. Etter det blandes dråpene med glassstenger (separat for hver). I løpet av fem minutter, rist forsiktig på platen, se på utseendet til hemagglutinasjonsreaksjonen. Det er funnet i det faktum at små røde klumper dukker opp, og deretter smelter sammen til større. På dette tidspunktet mister serumet nesten helt fargen.

For å eliminere falsk hemagglutinasjonenkel liming av erytrocytter, må du legge til en dråpe saltvann etter tre minutter og sjekke om agglutinasjon vedvarer. I så fall er det sant. Det er det, definisjonen av blodgrupper i henhold til ABO-systemet er nå fullført.

Tolkning av resultater

Som et resultat kan fire reaksjoner observeres:

• ingen agglutinasjon forekommer med noen av seraene - den første gruppen er O (I);
• reaksjonen manifesterte seg med sera I (ab) og III (a) - den andre gruppen A (II);
• agglutinasjon forekommer med sera I (ab) og II (b) - den tredje gruppen B (III);
• hvis reaksjonen skjer med tre sera,en ytterligere prosedyre må utføres med reagenser i gruppe AB (IV), som er standard; hvis det ikke er agglutinasjon i en slik dråpe, kan vi anta at dette er den 4. blodgruppen AB (IV).

Rask metode for Rh-faktoren

Metoden for å bestemme blodgrupper i henhold til ABO-systemet innebærer samtidig påvisning av Rh-faktoren (Rh).

Overflaten på platen er forfuktet ogskriv på "kontrollserum" og "anti-rhesus serum". Deretter plasseres en eller to dråper av de nødvendige reagensene under inskripsjonene og det analyserte materialet tilsettes dem. For dette kan du også bruke blod fra en finger (i samme mengde som volumet av serum) eller erytrocytter som er igjen på bunnen av røret etter at en blodpropp (halvparten av serumvolumet) ser ut. Valg av materiale påvirker ikke det endelige resultatet. Deretter blandes blod og serum med en tørr glassstang, hvoretter reaksjonen forventes i fem minutter. For å eliminere falske målinger, tilsettes en isoton natriumkloridoppløsning etter tre til fire minutter (bare noen få dråper). Bestemmelse av blodgruppen i henhold til ABO og Rh-systemet utføres veldig ofte.

Hvis agglutinering av erytrocytter i en dråpe medserum oppstår, dette indikerer Rh-positivt blod. Ifølge statistikk finnes Rh + i 85% av verdens befolkning. Dens fravær tillater oss å snakke om Rh-negativ tilknytning. Hvis agglutinasjon vises i kontrollserumet, har det blitt ubrukelig. Dessverre fungerer ikke ABO-blodgruppebestemmelsesalgoritmen perfekt.

Hvilke feil kan gjøres med denne teknikken?

Unøyaktigheter ved bestemmelse av blodtilhørighet til en bestemt gruppe avhenger av følgende årsaker:

• Teknisk.
• Den biologiske spesifisiteten til blodet som studeres.
• Mangelfull karakter av standard sera og erytrocytter.

Tekniske feil

Mulige feil i å bestemme blodgruppen i ABO-systemet på tvers:

• Serum feilplassert på tallerkenen.
• Feil kvantitative proporsjoner av materialet.
• Bruk av utilstrekkelig rene retter ellerplater som kommer i kontakt med blod (hvert serum skal samles med en separat pipette, som skal vaskes med en natriumkloridoppløsning (i en konsentrasjon på 0,9%)).
• Feil registrering av det analyserte materialet.
• Manglende overholdelse av tiden det tarbegynnelsen av agglutinasjon, - du bør ikke skynde deg og ta hensyn til reaksjonen før utløpet av fem minutter, fordi det kan være svake agglutinogener i blodet. Overeksponering er heller ikke verdt det, fordi dråpene kan tørke ut fra kantene og føre til en falsk konklusjon. Det er viktig å følge reglene for å bestemme blodgruppen i henhold til ABO-systemet.
  
• Feil sentrifugering kan også føre til falske resultater.
• Lufttemperaturen overstiger tillattpåvirker fraværet av agglutinasjon. For å unngå feil av denne typen, må du bruke et spesielt serum designet for å fungere i varme klimaer. Det er nødvendig å bestemme blodgrupper på en plate eller plate, hvis ytre overflate senkes ned i kaldt vann.

Biologiske spesifikke feil

Feil assosiert med den biologiske spesifisiteten til det analyserte blodet er delt inn i to typer.

• Avhengig av egenskapene til erytrocytter.
• Feil på grunn av serumets biologiske egenskaper.

Vurder hver visning mer detaljert.

Avhengig av egenskapene til erytrocytter

• Sen agglutinasjon på grunn av "svak"former av erytrocytter og antigener. For å unngå feil, er det nødvendig å bestemme blodgruppen til givere og mottakere som bruker standard erytrocytter. Identifiser agglutinogen A₂ bør undersøkes på nytt med andre typer reagenser og annet glass, noe som øker tidspunktet for registrering av reaksjonen.
• "Panagglutination" ("autoagglutination") - dyktighetblod viser den samme uspesifikke reaksjonen med alle sera, inkludert dine egne. Etter fem minutter svekkes alvorlighetsgraden av slik agglutinasjon, selv om den skulle øke. Lignende tilfeller er observert hos kreftpasienter, brannpasienter, etc. Som en kontroll er det nødvendig å evaluere manifestasjonen av agglutinering av de analyserte erytrocyttene i standard serum i den fjerde gruppen og saltvann. Med "panagglutination" bestemmes blodgruppen som et resultat av trippel vasking av erytrocytter. Hvis det ikke gir det ønskede resultatet, er det verdt å trekke en blodprøve på nytt i et rør som varmet opp før prosedyren, og legge prøven i en termokontainer for å opprettholde temperaturen på 37 grader Celsius og over. Deretter skal den føres til laboratoriet der temperaturen som er angitt ovenfor opprettholdes og oppvarmet saltløsning, plate og reagenser brukes.

• Noen ganger røde blodlegemer i blodprøvener ordnet som "myntkolonner", og de kan forveksles med agglutinater. Hvis du tilsetter to dråper isoton løsning og rister tabletten forsiktig, er de røde blodcellene i riktig posisjon.
• Ufullstendig eller blandet agglutinasjon som forekommer hos pasienter med andre, tredje og fjerde gruppe som et resultat av benmargstransplantasjon eller i de første tre månedene etter blodtransfusjon 0 (I).

Biologisk serum

• Under rutinemessig testing som et resultattidligere sensibilisering, oppdages antistoffer med en annen spesifisitet. Det er nødvendig å bestemme det og velge erytrocytter uten innholdet av antigenet som immunisering ble oppdaget til. Mottakeren må være sikker på å velge kompatibelt donorblod individuelt.
• Det er ingen antistoffer A og B, som observeres hos nyfødte og pasienter som lider av undertrykkelse av humoristisk immunitet.
• Med dannelsen av "myntkolonner" unormaltresultatet må bekreftes ved å ta standard erytrocytter i den første gruppen. Natriumkloridløsningen og platetristingen hjelper til med å skille mellom ekte agglutinater og myntstenger.
  

Feil forbundet med bruk av defekte erytrocytter og sera

Svak sera med en tidligere holdbarhet eller med en titer på mindre enn 1:32 er i stand til å generere svak og sen agglutinasjon. Bruk av slike reagenser er uakseptabelt.

Bruk av ubrukelige standard røde blodlegemereller sera fremstilt under ikke-sterile forhold og bevart utilstrekkelig, fører til utseendet av "bakteriell" agglutinering av ikke-spesifikk natur.

Det er mange populære antagelser omblodgrupper i ABO-systemet, som dukket opp umiddelbart etter det ble oppdaget i forskjellige verdenskulturer. Så, for eksempel, i 30-årene av forrige århundre i Japan og noen andre land, ble en teori som forbinder en blodgruppe med en bestemt type personlighet populær. Lignende teorier er populære i dag.

Det er også en oppfatning at en person med gruppe A er utsatt for en alvorlig bakrus, O er assosiert med gode tenner, og gruppe A2 har det høyeste IQ-nivået. Men slike påstander er ikke vitenskapelig bevist.

Vi undersøkte bestemmelsen av blodgrupper i henhold til ABO-systemet ved bruk av standard sera.